Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Vorbereitung von Agarosegel für die Elektrophorese

Haben Sie Schwierigkeiten bei der Zubereitung von Agarosegel?Lassen Sie weitermachenUnser Labortechniker bei der Vorbereitung des Gels.

Der Herstellungsprozess von Agarosegel umfasst die folgenden Schritte:

Wiegen von Agarose-Pulver

Wiegen Sie die benötigte Menge Agarosepulver entsprechend der gewünschten Konzentration für Ihr Experiment ab. Übliche Agarosekonzentrationen liegen zwischen 0,5 % und 3 %. Höhere Konzentrationen werden zur Trennung kleinerer DNA-Moleküle verwendet, während niedrigere Konzentrationen für größere Moleküle verwendet werden.

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Pufferlösung vorbereiten

Fügen Sie das Agarosepulver einem geeigneten Elektrophoresepuffer hinzu, z. B. 1× TAE oder 1× TBE. Das Puffervolumen sollte dem für Ihr Experiment benötigten Gelvolumen entsprechen.

Auflösen der Agarose

Erhitzen Sie die Agarose- und Puffermischung, bis sich die Agarose vollständig auflöst. Dies kann mit einer Mikrowelle oder einer Kochplatte erfolgen. Rühren Sie die Lösung zwischendurch um, damit sie nicht überkocht. Die Agaroselösung sollte klar werden und keine sichtbaren Partikel aufweisen.

Abkühlen der Agaroselösung

Lassen Sie die erhitzte Agaroselösung auf etwa 50–60 °C abkühlen. Rühren Sie die Lösung während des Abkühlvorgangs um, um ein vorzeitiges Erstarren zu verhindern.

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Hinzufügen von Nukleinsäure-Färbung (optional)

Wenn Sie DNA oder RNA im Gel sichtbar machen möchten, können Sie zu diesem Zeitpunkt eine Nukleinsäurefärbung wie GelRed oder Ethidiumbromid hinzufügen. Tragen Sie beim Umgang mit diesen Flecken Handschuhe und seien Sie vorsichtig, da sie giftig sein können.

Gießen des Gels

Gießen Sie die abgekühlte Agaroselösung in eine vorbereitete Elektrophorese-Gelform. Setzen Sie einen Kamm ein, um Probenvertiefungen zu erzeugen. Stellen Sie dabei sicher, dass der Kamm sicher sitzt und die Lösung gleichmäßig in der Form verteilt ist.

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 Gelverfestigung

Lassen Sie das Gel bei Raumtemperatur erstarren, was je nach Konzentration und Dicke des Gels normalerweise 20 bis 30 Minuten dauert.

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REntfernen des Kamms

Sobald das Gel vollständig verfestigt ist, entfernen Sie vorsichtig den Kamm, um die Probenvertiefungen freizulegen. Legen Sie das Gel zusammen mit der Form in die Elektrophoresekammer und bedecken Sie diese mit der entsprechenden Menge Elektrophoresepuffer. Stellen Sie dabei sicher, dass das Gel vollständig eingetaucht ist.

Vorbereitung auf die Elektrophorese

Nachdem das Gel fertig ist, laden Sie Ihre Proben in die Vertiefungen und fahren Sie mit dem Elektrophorese-Experiment fort.

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Wenn Sie Probleme mit der Gelzubereitung haben, können Sie sich gerne an uns wenden. Für die Kommunikation mit Ihnen stehen uns professionelle Labortechniker zur Verfügung.

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Zeitpunkt der Veröffentlichung: 15. Okt. 2024