DNA-Gelelektrophorese: Analyse genetischer Fragmente

Die DNA-Gelelektrophorese ist eine gängige molekularbiologische Technik zur Trennung und Analyse von DNA-Fragmenten anhand ihrer Größe.Dabei werden unterschiedlich große DNA-Fragmente auf ein Gel aus Agarose geladen, einem Kohlenhydrat, das in Rotalgen vorkommt.

Vorbereiten und Gießen des Agarosegels

1. Agarose in einer geeigneten Menge Elektrophoresepuffer auflösen.Die Konzentration des Gels wird durch das Masse-Volumen-Verhältnis bestimmt, beispielsweise 1 g Agarose in 100ml Puffer für ein 1 %iges Gel.
2. Erhitzen Sie die Mischung in der Mikrowelle und drehen Sie den Behälter, um eine vollständige Auflösung der Agarose sicherzustellen.
3. Fügen Sie der Gellösung Ethidiumbromid hinzu, bis eine Endkonzentration von 0,5 erreicht istmg/ ml.Ethidiumbromid interkaliert zwischen benachbarten DNA-Basenpaaren und emittiert unter UV-Licht orange Fluoreszenz.Beachten Sie, dass Ethidiumbromid krebserregend ist. Daher erfordert der Umgang damit angemessene Sicherheitsmaßnahmen wie das Tragen von Handschuhen.
4. Kühlen Sie die Gellösung in einem Wasserbad ab, um zu verhindern, dass sich die Gelschale aufgrund hoher Temperaturen verzieht.
5. Legen Sie einen Kamm in die Gellösung, um Probenvertiefungen zu bilden.Wählen Sie Kämme aus, die für die Menge der DNA-Probe geeignet sind, die Sie laden möchten.Gießen Sie die Agarosegellösung hineinGelschaleund lassen Sie es bei Raumtemperatur erstarren.
6. Sobald das Gel fest geworden ist, entfernen Sie den Kamm.Wenn Sie das Gel nicht sofort verwenden, wickeln Sie es in Plastikfolie ein und lagern Sie es bis zur Verwendung bei 4 °C.

Vorbereiten und Auftragen des Gels

Mischen Sie vor Beginn der Elektrophorese die DNA-Probe mit Ladepuffer.Der Ladepuffer ist normalerweise sechsmal konzentrierter und trägt dazu bei, dass die Probe auf den Boden der Vertiefungen sinkt und die Bewegung während der Elektrophorese verfolgt.

Stellen Sie das Netzteil auf die angegebene Spannung ein.

Geben Sie ausreichend Elektrophoresepuffer in den Geltank, um die Geloberfläche zu bedecken.Sicherstellendie richtigen Elektrodenanschlüsse.

Laden Sie die DNA-Probe und die Molekulargewichtsmarker in die Gelvertiefungen.

Schalten Sie die Stromversorgung ein, um die Elektrophorese zu starten.

Beobachtung getrennter DNA-Fragmente

Schalten Sie nach der Elektrophorese die Stromversorgung aus und entfernen Sie das Gel.

Verwenden Sie eine UV-Lichtquelle, um das Gel zu beleuchten.DNA-Fragmente erscheinen als orange fluoreszierende Banden.

Dokumentieren Sie das Gelbild, um die getrennten DNA-Fragmente zu analysieren.

Stellen Sie nach dem Experiment sicher, dass das Gel und der Elektrophoresepuffer gemäß den Laborrichtlinien ordnungsgemäß entsorgt werden.Tragen Sie beim Umgang mit Gelen und Puffern, die Ethidiumbromid enthalten, immer Handschuhe, um sich vor der Exposition gegenüber dieser gefährlichen Substanz zu schützen.

Die DNA-Gelelektrophorese wird in der Molekularbiologie und Genetikforschung häufig eingesetzt, um unter anderem die Größe von DNA-Molekülen abzuschätzen, DNA-Fragmente zu trennen, Genmutationen zu erkennen und DNA-Fingerprinting durchzuführen.Es handelt sich um eine einfache und effektive experimentelle Technik, die dabei hilft, die Zusammensetzung und Eigenschaften von DNA-Proben zu verstehen.

Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, ein professioneller Hersteller, der sich seit über 50 Jahren auf Elektrophoreseprodukte konzentriert, bietet eine Reihe von Elektrophoresetanks (Kammern/Zellen) für die Gelelektrophorese an, beispielsweise horizontale Elektrophoresetanks (Kammern/Zellen) fürDNAGelelektrophorese und vertikale Elektrophoresetanks (Kammern/Zellen) für die Proteingelelektrophorese.Mittlerweile bietet es auch verschiedene Arten von Elektrophorese-Stromversorgung, Schrank-Dark-Box-Analysator und UV-Transilluminator.Sie können die Elektrophoresetanks (Kammern/Zellen) von Beijing Liuyi wählen, um das Molekulargewicht von RNA zu messen und RNA unterschiedlicher Größe für Ihr Labor zu trennen.

Hier werden wirempfehlenein Typ eines horizontalen Elektrophoresetankmodells (Kammer/Zelle).DYCP-31DN um das Gel herzustellen und laufen zu lassen.

Nach dem Ausführen des Gels können Sie unser Gelbild- und Analysesystemmodell verwendenWD-9413Bum das Gel zu beobachten, zu analysieren und zu fotografieren.Liuyi Biotech bietet auch einen UV-Transilluminator (UV-Analysator) zur Beobachtung des Gels an.Wir verfügen über ein Black-Box-Modell mit UV-Transilluminator (UV-Analysator).WD-9403A,9403C,WD-9403F, tragbares UV-Transilluminator-Modell (UV-Analysator).WD-9403Bund tragbarer UV-Transilluminator (UV-Analysator)WD-9403Edenn du wählst.

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