Die Betriebsschritte für das halbtrockene Trans-Blot-Gerät DYCP-40C

Das halbtrockene Blotting-System DYCP-40C wird zusammen mit der Elektrophorese-Stromversorgung zum Übertragen der Proteine ​​in den Polyacrylamidgelen auf die Membran wie Nitrozellulosemembran, Nylonmembran und PVDF-Membran verwendet.Halbtrockenes Blotting wird mit Graphitplattenelektroden in horizontaler Konfiguration durchgeführt, wobei ein Gel und eine Membran zwischen Blättern aus mit Puffer getränktem Filterpapier liegen, die als Ionenreservoir fungieren.Beim elektrophoretischen Transfer wandern negativ geladene Moleküle aus dem Gel in Richtung der positiven Elektrode, wo sie sich auf der Membran ablagern.Die Plattenelektroden, die nur durch den Gel- und Filterpapierstapel getrennt sind, sorgen für eine hohe Feldstärke (V/cm) im gesamten Gel und ermöglichen so sehr effiziente und schnelle Transfers.Die Übertragungsfläche der kleineren Elektrophoresezelle DYCP – 40C beträgt 150 × 150 (mm) und eignet sich für die Übertragung von Standardgelen, einschließlich der Gele der Elektrophoresezellen DYCZ-24DN und DYCZ-24EN.

Lassen Sie uns mehr über die Funktionsweise dieses halbtrockenen Trans-Blot-Geräts erfahren.

Materialien, Instrumente für den Betrieb von DYCP-40C
Elektrophorese-Netzteil DYY-6C, halbtrockenes Trans-Blot-Gerät DYCP-40C, Pufferlösung und Behälter für Pufferlösung.usw.

Bedienungsschritte
1. Geben Sie das Gel mit den Glasplatten in die Transferpufferlösung

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2. Messen Sie die Gelgröße

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3.Bereiten Sie 3 Stück Filterpapier entsprechend der Gelgröße vor. Die Größe des Filterpapiers sollte etwas größer als die Gelgröße sein.Hier verwenden wir Whatman-Filterpapier;

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4.Geben Sie 3 Stück Filterpapier langsam in die Pufferlösung und lassen Sie das Filterpapier vollständig in den Puffer eintauchen. Vermeiden Sie Luftblasen.

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5.Bereiten Sie die Nitrozellulosemembran entsprechend der Größe des Gels und des Filterpapiers vor und schneiden Sie sie zu.Die Größe der Nitrozellulosemembran sollte größer sein als die Größe des Gels und des Filterpapiers.

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6.Legen Sie die Nitrozellulosemembran in die Pufferlösung.

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7.Nehmen Sie die 3 Filterpapierstücke heraus und tropfen Sie überschüssige Pufferlösung weg, bis keine Pufferlösung mehr von der Membran tropft.und legen Sie dann das Filterpapier auf die Unterseite von DYCP-40C;

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8.Nehmen Sie das Gel von den Glasplatten, reinigen Sie das Stapelgel vorsichtig und geben Sie das Gel in die Pufferlösung.

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9.Legen Sie das Gel auf das Filterpapier. Beginnen Sie an einem Ende des Gels, um Luftblasen zu vermeiden.

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10.Entfernen Sie die Luftblasen zwischen Gel und Filterpapier mit einem geeigneten Werkzeug.

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11.Bedecken Sie das Gel mit der Nitrozellulosemembran, wobei die raue Seite zum Gel zeigt.Entfernen Sie dann mit einem geeigneten Werkzeug die Luftblasen zwischen der Membran und dem Gel.Legen Sie 3 Stück Filterpapier auf die Membran.Sie müssen immer noch ein geeignetes Werkzeug verwenden, um die Luftblasen zwischen dem Filterpapier und der Membran zu entfernen.

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12.Decken Sie den Deckel ab und stellen Sie die Betriebsparameter der Elektrophorese ein, den Konstantstrom 80 mA;

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13.Die Elektrophorese ist abgeschlossen.Wir erhalten das Ergebnis wie folgt:

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Zeitpunkt der Veröffentlichung: 04.04.2023